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synvolux SAINT蛋白說明書

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SAINT - PROTEIN

P R O T E I N D E L I V E R Y S Y S T E M

 

SAINT蛋白

為使用 SAINT-蛋白(目錄號:編號SP-3004-01、SP-3004-02、SP-3004-04)。本方案中的量適用于 24 孔板的單個孔。其他格式請參見本頁底部的表 1。P RO TE IN DE LI VE RY SY SS TE M

 

一般轉染方案

 

1. 準備細胞進行轉染。

  • 貼壁細胞:轉染前 1 天,將細胞接種于 0.5 mL 生長培養基中,使細胞在轉染時達到 80% 融合。轉染前,立即用不含血清的相同培養基(無血清培養基)替換生長培養基。
  • 懸浮細胞:轉染當天,在 0.5 mL 無血清培養基中以其大密度的約 80% 鋪板細胞。

2. 使 SAINT-蛋白小瓶達到室溫。

3. 充分渦旋 SAINT-蛋白約 30 秒。

4. 使用 1:10 的蛋白 (µg) 與 SAINT-蛋白 (µl) 比例制備復合物。對于每份轉染樣品,按照以下方法制備復合物:

a. 在 50µl PBS 中稀釋 2µg 蛋白。

b. 向蛋白/PBS 溶液中加入 20µl SAINT-蛋白,并輕輕重懸。

5. 在室溫下孵育混合物 5-10 min(溶液可能出現渾濁)。

6. 向細胞中加入復合物 (70µl)。

7. 在 CO2 培養箱中于 37 ℃ 下孵育 4 小時。

8. 如果需要更長時間的孵育,加入 50µl 血清,將血清濃度調整至 8%。

9. 進行檢測。

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